Sigma P5147蛋白酶 來源于灰色鏈霉菌

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

別名:

Actinase E, Pronase E

特異性

  一種具有包括細(xì)胞外絲氨酸蛋白酶在內(nèi)至少三種蛋白水解活性的混合物。通常，絲氨酸蛋白酶可顯示出廣泛的底物特異性，而這被視為通過分子中由一個Asp、一個His和Ser殘基組成的活性位點(diǎn)所介導(dǎo)的。該酶更傾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基側(cè)的肽鍵。

應(yīng)用

  來自灰色鏈霉菌的蛋白酶已被用于：

• 消化髓核（NP）組織
• 催化不對稱曼尼希一鍋反應(yīng)
• 淀粉脫蛋白[3]
• 消化細(xì)胞解離用腦切片

  來自Sigma的酶已用于抗凝血酶-肝素復(fù)合物的消化和分析。[5]它還用于分離抗酶淀粉。

  蛋白酶是一種通過水解肽鍵來分解蛋白的酶。 蛋白酶用于降解蛋白、研究蛋白酶抑制劑和研究熱滅活動力學(xué)。 蛋白酶用于孵育中核酸的分離過程。 來自灰色鏈霉菌的蛋白酶已用于通過四肽醛和絲氨酸蛋白酶而形成的共價復(fù)合物的結(jié)晶學(xué)和動力學(xué)研究中[7]。

蛋白酶通常用于核酸的分離過程，通過補(bǔ)充0.2％十二烷基硫酸鈉和10 mM EDTA并孵育0.5-3.0小時。

  該酶比已知堿性蛋白酶在更高的pH范圍內(nèi)更具活性，即使在0.2N NaOH溶液中也顯示出了蛋白水解活性。該酶用于不溶性蛋白的蛋白水解和蛋白的結(jié)構(gòu)研究。

生化/生理作用

  蛋白酶可通過肽鍵的水解使蛋白質(zhì)分解代謝。 蛋白酶可被絲氨酸活性位點(diǎn)抑制劑所滅活，如苯甲基磺酰氟（PMSF）和二異丙基氟磷酸鹽。 來自灰色鏈霉菌的蛋白酶是一種具有包括細(xì)胞外絲氨酸蛋白酶在內(nèi)至少三種蛋白水解活性的混合物。絲氨酸蛋白酶顯示出廣泛的底物特異性，而這被視為通過分子中由一個Asp、一個His和Ser殘基組成的活性位點(diǎn)所介導(dǎo)的。該酶更傾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基側(cè)的肽鍵。

  該產(chǎn)品是由至少三種酪蛋白水解活性和一種氨肽酶活性所組成的混合物。[8]該酪蛋白分解酶被命名為灰色鏈霉菌蛋白酶A、灰色鏈霉菌蛋白酶B和灰色鏈霉菌胰蛋白酶。當(dāng)需要廣泛或完全降解蛋白質(zhì)時，可使用該產(chǎn)品。該蛋白酶混合物是高度非特異性的并可作為單氨基酸消化酪蛋白至>70％的程度。

特點(diǎn)和優(yōu)勢

• 在pH 5.0中9.0范圍內(nèi)高度穩(wěn)定，在pH 8.8具有最高活性
• 與多種DNA和RNA分離緩沖液兼容
• 廣泛的底物特異性

質(zhì)量

含有醋酸鈣。

物理屬性

  通過在80 °C以上加熱15-20分鐘以完全滅活。

單位定義

  在pH 7.5，37 °C 條件下，一單位的酶每分鐘將會水解酪蛋白以產(chǎn)生與1.0 μ摩爾 (181 μg) 酪氨酸等同的顏色（Folin-Ciocalteu試劑提供的顏色）。

制備說明

  收集自灰色鏈霉菌的培養(yǎng)基肉湯中。

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